PLATE-FORME EXPÉRIMENTALE

Localisation et accès à un plateau technique

VigiCell a choisi de s'installer à Villejuif (Val de Marne, Ile de France) sur le site de l'Institut André Lwoff (CNRS).

VigiCell dispose d'un laboratoire (250m²) de biologie cellulaire et moléculaire entièrement équipé et d’un accès à un plateau technique important (ex. : cytométrie de flux, microscopie confocale, ...).

L'environnement scientifique immédiat de VigiCell est dédié à la santé humaine et à la biologie de la santé humaine (CNRS / INSERM / Hôpital Paul Brousse / Hôpital du Kremlin-Bicêtre).

Techniques d'analyse

• cytométrie d’image

• Cytomètrie en flux

• PCR

• Luminométrie

• fluorimétrie

• etc.

Analyse cellulaire multiparamètrique :

Disposer d’une vision globale des principaux effets cellulaires in vitro et in vivo

Expérimentations in vitro

Santé cellulaire

• apoptose/nécrose
• activité mitochondriale
• XTT
• Sonde DioC6 (Cytométrie de flux)
• Mesure de l'ATP (luminométrie)
• morphologie (Microscopie)
• prolifération (comptage ; Cytométrie d'image)
• cycle cellulaire (dénombrement population G0/G1+S+G2/M ; Cytométrie de flux)
• stress oxydant
• Sonde DAF-FM DA (Monoxyde azote - Fluorimétrie)
• Modulation de gènes (Q-PCR)
• stress cellulaire (Modulation de gènes de stress ; Q-PCR et ELISA)
• Intégrité membranaire
• Bleu trypan
• LDH
• 7AAD/IP (cytométrie de flux)

Barrière Hémato-Encéphalique (BHE) :

• mesure de permeabilité (A vers B et B vers A)
• mesure des propriétés de l'endothélium cérébral
• diffusion paracellulaire
• régulation des transporteurs

Génotoxicité

• test d'Ames
• Test comêtes (cytométie d'image)
• test micro-noyau (cytométie d'image)
• adduits à l'ADN (post-marquage P32)
• Fragmentation de l'ADN (TUNEL)
• Indice de dénaturation de l'ADN (chromomycine, bleu d’aniline)
• Analyse de l'aneuploidie (FISH)
• Caryotype / aberrations chromosomiques (anomalies de nombre et de structure)
• Caryotype moléculaire (puce génomique, basse et haute résolutions)
• Analyse de mutation et de fragment (PCR et séquençage)
• Analyse de profil d’expression (puce d’expression)
• Tumérogénicité (xénogreffes hétéro et orthotopiques souris + rat immunodéprimés)
• modulation de gènes (bax, p21, p53, mdm2, gadd45, …)

 

Angiogenèse

• Identification de substances agonistes ou antagonistes au VEGF
• Comblement de lésions sur monocouche endothéliale
• Formation de tubes endothéliaux
• Invasion et migration en chambres de Boyden
• mesure de l'exression des récepteurs au VEGF (indication sur les mécanismes d'action)
• Mesure de marqueurs géniques (indication sur les mécanismes d'action)

Inflammation

• Suivi du passage transendothélial de lymphocytes
• Activation des molécules d’adhérence
• mesure de cytokines (ex. : IL-1, IL-6, IL-8, TNF-alpha, etc.)

Perturbateurs endocriniens

• stéroïdiens (interactions avec les récepteurs hormonaux)
• thyroïdens (modulation des enzymes D2 et D3)

Métabolisation

• inhibition ou induction des CYP
• stabilité métabolique

Reprotoxicité

• follicle Biossay
• in vitro maturation assay
• in vitro fertilization assay
• mouse embryo assay
• embryonic stem cell test
• uterine contractivity
• sperm analysis

Prélèvements biologiques in vivo chez l'Homme

Suivi des effets biologiques d'expositions réelles (produits commercialisés, conditions de travail, étude clinique, etc.) par l'analyse des réactions cellulaires et des dégats moléculaires à partir de prélèvements peu ou pas invasifs. Les effets cellulaires sont comparables à ceux observés in vitro.

Sang

• Globules rouges
• plasma
• sérum
• lymphocytes
• progéniteurs endothéliaux (PEC)

Air expiré

• suivi de résidus de stress oxydant

Exposition et prélèvements biologiques in vivo chez l'animal (partenariat)

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